兔ELISA試劑盒用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)洗滌后用底物(TMB)顯色。檢測(cè)的動(dòng)物類有小鼠、大象、虎、羊、馬、蝌蚪、蟾蜍、牛、熊貓、金黃地鼠、豬、兔、蜥蜴、河馬、獼猴、類人猿、狒狒、鹿等,還可檢測(cè)植物類,如扁豆、豌豆、四季豆、馬鈴薯、菠菜、蘿卜、豇豆等。
兔ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存:
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3.尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。